无菌室设计10点要求

2020-07-06 11:08:39 admin 44

无菌室设计10点要求

  无菌室一般是在微生物实验室内专辟的一个小房间,面积不宜过大,约4㎡—5㎡,高2.5m左右即可。无菌室外要设一个缓冲间、净化风淋间及更衣间,无菌室和缓冲间都必须密闭,室内装备必须有空气过滤装置,无菌室和缓冲间都装有紫外线灯,无菌室的紫外线灯距离工作台面lm,无菌室内的地面、墙壁必须平整,不易藏污垢,便于清洁,工作台的台面必须处于水平状态,工作人员进入无菌室应在更衣室穿戴好灭菌的衣、帽、鞋,经过净化风淋室,再到缓冲间,然后进入无菌室进行检验工作。

  县级市的企业一般实验室多使用小型超净工作台,超净工作台其结构简单,便于移动,工作台内有紫 外灯和净化风机,外部是推拉式小门或开两个洞的玻璃门,操作时将双臂伸进去即可。

  对于无菌室设计一般有如下的要求:

  1、无菌操作间的洁净度应达到10000级,室内温度保持在20℃-24℃,湿度保在45%—60%,超净台洁净度应达到100级。无菌室应每月检查菌落数,在无菌室或超净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的平板计数琼脂培养基的 15mL,放至凝固后,倒置于36℃ ±1℃培养箱培养 48h,证明无菌后,取平板 3—5个,分别放置在工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于36℃ ±1℃培养箱培养 48h,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落,10000级的洁净室平均不得超过3个菌落,如超过限度,应对无菌室进行彻底消毒,直至重复检查合乎要求为止;

  2、无菌室应保持清洁整齐,室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种环、剪刀及玻璃笔等。严禁堆放杂物,以防污染;

  3、无菌室应备有工作浓度的消毒液 ,如 5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液等等;

  4、需要带入无菌室使用的仪器、药品、玻璃器皿等一切物品,均应包扎严密或应经适宜的方法灭菌,如培养皿、吸管用不锈钢简装好在160℃-170℃的干燥箱中灭菌1h—2h;生理盐水用高压灭菌器于121℃灭菌20分钟等;

  5、无菌室使用前必须打开无菌室和缓冲间的紫外灯辐照30分钟以上,并且同时打开净化风机进行换气,在紫外灯关闭后半小时方可进入无菌室进行工作,在样品检验完毕后,应及时清理剩余样品和各种药品及玻璃器皿,安全退出后再打开所有紫外灯辐照灭菌30分钟;

  6、送检样品在检验前应保持外包装完整 ,不得开启以防污染,检验前,用75%的酒精棉球消毒外表面,必要时用点燃的酒精棉进行灭菌;

  7、每次操作过程中,均应做空白对照,以检查无菌操作的可靠性;

  8、吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管,如吸管碰到手及其它未灭菌的物体,必须重新更换,以防污染;

  9、接种针每次使用前后,必须通过火焰燃烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物;

  10、带有菌液的吸管、试管等器皿应浸泡在盛有5%的来苏儿溶液的消毒桶内消毒,24h取出冲洗;培养皿则需在高压灭菌器中重新灭菌后方可处理营养基,切记不要直接冲入下水道中,防止阻塞。如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或 3%的来苏儿倾覆在被污染处至少30min,再做处理,工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤。